重組單克隆抗體是使用重組DNA 技術產生的抗體,具體是指通過DNA重組技術將抗體相應的基因序列根據需要進行改造和重組,并構建在質粒上,再通過蛋白外源表達技術將構建好的質粒轉染/轉化入適合的宿主細胞表達獲得的抗體。重組抗體很好的解決了動物源抗體引起的人體排斥反應,使得抗體實現人源化。
泰克生物擁有重組抗體表達生產平臺,豐富的重組蛋白和重組抗體表達經驗,能夠為客戶提供包括人源、鼠源、兔源、羊源、犬源、駝源、牛源等各種種屬的重組IgG抗體表達服務,客戶只需要提供抗體序列信息、雜交瘤細胞或cDNA,公司的技術支持可以根據客戶的需求進行方案設計和表達優化,結合公司自主設計的哺乳高表達載體和大規模重組抗體發酵平臺,為客戶提供優質的重組抗體制備服務。
重組抗體的開發方法主要分為三類:1. 噬菌體展示技術:通過噬菌體展示技術可以從大容量的抗體多肽庫中篩選到與特異性受體結合的高親和力的多肽。與基因重組技術結合,可以將目的基因克隆出來,通過噬菌體展示技術對表達的抗體蛋白進行展示并篩選出特異性強、親和力高的抗體??返律锟商峁┗谑删w展示技術的重組抗體生產,詳情可與我們聯系。2. B細胞克隆技術:通過動物免疫,分離獲得漿細胞,經流式細胞術將其分離。擴增篩選出的細胞基因,將其克隆到載體中,使用ELISA篩選出表達較好的克隆,對其進行測序,從而在體外制備出重組抗體。3. 雜交瘤測序:對已制備出的雜交瘤進所獲得的抗體進行基因測序,利用體外重組技術表達抗體。
█ 重組抗體的制備流程
█ IgG免疫效應
-- Fab段與抗原結合,發揮中和作用;
-- 補體依賴的細胞毒作用(CDC):Fc段激活補體,形成膜攻擊復合物,能夠溶解靶細胞;
-- 調理及吞噬作用(ADCP):Fc段可與中性粒細胞、巨噬細胞表面Fc受體結合,增強吞噬細胞吞噬作用;
-- 抗體依賴的細胞介導的細胞毒作用(ADCC):Fc段與自然殺傷細胞表面的Fc受體結合,介導自然殺傷細胞對靶細胞的殺傷。
█ 抗體種類
在人類血清中發現有五類抗體,相關情況如下所示:
IgA | IgD | IgE | IgG | IgM | |
重鏈 | α | δ | ε | γ | μ |
位置 | 血管內和分泌物 | B細胞表面 | 唾液和鼻腔分泌物中的嗜堿性細胞和肥大細胞 | 血管內和血管外 | 主要在血管內 |
作用 | 保護粘液膜 | 不明 | 防止寄生蟲并與過敏反應有關 | 二級免疫反應 | 初級免疫反應 |
亞類 | IgA1 IgA2 (2種) | 1 | 1 | IgG1、IgG2、IgG3、IgG4 (4種) | 1 |
Fc區域結合至 | 骨髓細胞 | B細胞 | 肥大細胞和嗜堿細胞 | 吞噬細胞 | B、T和NK細胞 |
IgD、IgE和IgG通常以單體形式存在,而IgA通常以二聚體形式存在,IgM以五聚體形式存在。
█ 不同IgG亞型抗體
種屬 | IgG類型 |
人 | IgG1/2/3/4 |
小鼠 | IgG1/2a/2b/2c/3 |
大鼠 | IgG1/2a/2b/2c |
兔 | IgG |
犬 | IgG |
泰克生物可提供以上各種種屬及亞型的重組抗體制備服務。
█ 重組抗體制備的亮點
-- 可對抗體的結構進行一系列改造與優化(包括人源化引入、人類IgG1類別的Fc區域等)從而提高抗體的親和力和穩定性。
-- 抗原選擇更加豐富,不受來源、純度和量的限制。
-- 不需要免疫動物,減少了動物實驗的數量問題。
-- 所得抗體的特異性和親和力都較強,可用于治療和檢測等領域。
█ 重組抗體制備的服務內容
流程 | 服務內容 | 交付 |
基因合成和密碼子優化 | 客戶可提供抗體/氨基酸序列或包含抗體基因的重組質粒 | 1. 純化抗體 2. 表達質粒 3. 質檢報告 |
載體構建 | 克隆至泰克生物高表達載體中;抽提質粒 | |
表達純化 | 瞬時轉染HEK293/CHO細胞; 純化抗體 | |
質檢分析 | SDS-PAGE;UV;內毒素分析、ELISA等(可選) |
█ 服務亮點
-- 已成功表達過多物種來源(人、鼠、兔等)的全長和scFv、Fab、VHH、嵌合抗體、雙特異性抗體、Fc融合抗體。
-- 哺乳動物細胞表達平臺:自主設計的高表達載體、優化的自主產權培養基和專有的轉染試劑。
-- 多個規格放大表達滿足不同客戶需求量。
-- 擁有專業的技術團隊,可定制個性化一對一抗體發現整體解決方案。