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mRNA免疫抗體制備服務
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  • mRNA免疫抗體制備服務

mRNA免疫抗體制備服務

產品報價:詢價

更新時間:2023/10/17 14:41:40

地:天津

牌:泰克生物

號:服務

廠商性質: 服務型,

公司名稱: 泰克生物科技(天津)有限公司

產品關鍵詞: mRNA免疫   mRNA免疫抗體制備服務   抗體制備服務  

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江經理 : (18920585432) (0400-1688285)

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近年來隨著mRNA合成、化學修飾mRNA和遞送技術的發展,mRNA穩定性和翻譯效率大幅提高,免疫原性逐步可控,其在腫瘤免疫治療領域顯示了巨大的商業價值。mRNA技術產品是基于mRNA指導蛋白合成的“中心法則”,在體外設計合成含有編碼特定抗原的mRNA序列,經過序列優化、化學修飾和純化等加工,采用不同方式遞送至人體細胞,利用機體細胞翻譯產生蛋白、誘導免疫應答、補充機體蛋白、調節免疫等作用,從而預防或治療疾病。人類90%以上的疾病與蛋白質相關,基于mRNA特性,mRNA技術在預防與治療疾病方面前景廣闊。


圖片2.jpg

Fig1 mRNA 免疫



泰克生物能夠為客戶提供多種抗原(包括但不限于PTM蛋白、細胞內蛋白、分泌蛋白)的mRNA免疫抗體制備服務,此外,泰克生物擁有包括從基因合成與修飾、AAV載體構建、動物免疫、雜交瘤細胞的融合與篩選、抗體生產等一站式技術服務,并且有配套的抗原抗體結合分析、抗原抗體BLI親和力測定、抗體細胞系驗證、等許多下游配套服務,為客戶的抗體藥研發與生產提供有力的支撐。

 

 mRNA的免疫原性

 

純化的mRNA包含單鏈RNA (single-stranded RNA, ssRNA)分子,通過遞送系統包裹并以內吞方式進入核內體,進入核內體后mRNA從遞送系統中釋放出來并被定位在膜上的Toll樣受體(Toll-like receptor, TLR))7和TLR-8識別,導致下游的髓樣分化標記物88 (myeloid differentiation marker 88, MyD88)被激活,引起I型干擾素(interferon, IFN)激活和炎癥因子的分泌。

 

 mRNA疫苗制備過程 

 

1. 制備IVT mRNA:抗原選擇、線性DNA模板合成、體外轉錄和mRNA純化。在對病原體的基因組進行測序后選擇目標抗原時,將其插入質粒 DNA 模板中。生產 DNA 模板應包含抗原序列、5′和3′ UTR以及5′UTR上游的T7啟動子。體外轉錄過程需要 DNA 模板、修飾或未修飾的核苷和 T7 RNA 聚合酶。

2. mRNA進入細胞質需要借助載體,mRNA疫苗的遞送載體包括病毒載體和非病毒載體兩種:病毒載體以慢病毒、腺病毒相關病毒和仙臺病毒等為主,病毒載體在進行核酸遞送的同時也可能會引起免疫反應,從而影響疫苗的效果,非病毒載體主要包括脂質體、樹突狀細胞(dendritic cell, DC)、無機納米粒子、陽離子細胞穿膜肽等。

 

 mRNA遞送系統

 

1.裸mRNA直接注射法:直接注射至組織中,通常使用蔗糖、海藻糖溶液等緩沖液對mRNA進行一定的稀釋處理。優點是成本低、方便快捷、缺點是mRNA極易被RNA酶降解,且難以穿過細胞膜。

2.體外DC負載:將mRNA離體加載或電穿孔入樹突狀細胞(Dendritic cells,DCs),體外負載樹突狀細胞有利于抗原呈遞細胞的靶向。

3.陽離子納米乳:一種基于水包油的遞送方式,由角鯊烯和表面活性劑如吐溫、生育酚等組成,MF59和AS03是2種水包油乳劑佐劑,應用于2009年的流感疫苗研究中。

4.陽離子肽和聚合物:Curevac公司利用魚精蛋白開發了狂犬和甲型流感的m RNA疫苗遞送,魚精蛋白富含精氨酸、賴氨酸等堿性氨基酸殘基,能夠與帶有負電荷的m RNA復合使其穩定。

5.LNP:LNP含有4種組分:陽離子可電離脂質、聚乙二醇(PEG)脂質、磷脂、膽固醇。陽離子可電離脂質是LNP中重要的一種組分,其電離系數與胞內內體基本保持一致,能夠促進m RNA順利包裝至LNP中,還在胞內參與mRNA從內體中釋放;PEG脂質提供膠體穩定性,防止蛋白與納米粒結合,從而減少網狀內皮系統對LNP的清除作用,增加體循環時長;中性磷脂如二硬脂?;蚜字╠istearoyl‐sn‐glycero‐phosphocho‐line,DSPC)和二棕櫚酰磷脂酰膽堿(dipalmitoyl‐phosphatidylcholine,DPPC),提供雙層磷脂穩定性結構;膽固醇提供剛性,提高LNP的硬度以及防止LNP成分泄露。

 

 mRNA藥物

 

(1)易在體外生產和純化,除去蛋白藥物及病毒載體制備的復雜過程,同時可避免宿主蛋白及病毒源性污染;

(2)IVT mRNA的生產工藝通用性強,可以快速應用于生產不同的目的蛋白,節省藥物研發時間;

(3)mRNA需進入細胞質即可翻譯成蛋白質,不需要進入細胞核,因此不存在基因的插入和整合,提高藥物的安全性;

(4)通過調節序列修飾和遞送載體可以改變其半衰期;

(5)臨床試驗發現,雖然mRNA的蛋白質表達是短暫性的,但其對于腫瘤的免疫治療應用較好,且有利于藥代動力學和劑量的控制。

 

 mRNA免疫服務流程

 


服務項目

內容

周期

mRNA合成

mRNA合成、修飾與組裝

4-6周

動物免疫

皮下多點注射,標準免疫流程,ELISA測血清效價

10周

融合與篩選

脾細胞與骨髓瘤細胞融合,ELISA篩選陽性克隆,擴增

4-6周

抗體生產

雜交瘤細胞生產,抗體純化

可選

 

 服務亮點

 

-- 不需要重組蛋白或多肽,省時省力

-- 無抗原污染風險

-- 生成具有高親和力和特異性的抗體

-- 陽性的雜交瘤細胞株3-5株(小鼠單抗)

-- 可提供抗體人源化服務并獲得的與原抗體具有相同的親和力的人源化抗體

-- 可提供一系列抗體體外驗證服務

-- 從基因合成與修飾、AAV載體構建、動物免疫、雜交瘤細胞的融合與篩選、抗體生產等一站式技術服務


泰克生物科技(天津)有限公司

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