兔碳酸酐酶III(CA3) ELISA 試劑盒
準備工作
1.孔板室溫平衡1小時
2.做好布板圖譜
3.樣本解凍
4.準備各型號的移液槍、槍頭、量筒
5.準備雙蒸水
6.根據樣本量配好樣本稀釋液
7.根據樣本量及洗板次數配好洗液
8.若需要提設置好振板器、洗板器
9.準備足夠量的擦手紙
10.根據說明書提示，溶解標準品
11.配制不同濃度的標準品
12.配制質控品
13.根據預實驗結果稀釋樣本
14.準備好封板膜
兔碳酸酐酶III(CA3) ELISA 試劑盒 怎么用 96T/48T
實驗步驟
1. 準備：準備好所有試劑、材料和器具。
2. 溫育：將包被有特異性抗體的酶標板放入37℃溫箱中溫育30分鐘。
3. 加樣：分別向各孔中加入標準品、待測樣本，輕輕混勻。
4. 溫育：將酶標板放入37℃溫箱中繼續溫育30分鐘。
5. 洗滌：清洗酶標板，除去未結合的抗原抗體。
6. 加酶標二抗：向各孔中加入酶標二抗，輕輕混勻。
7. 溫育：將酶標板放入37℃溫箱中繼續溫育30分鐘。
8. 洗滌：清洗酶標板，除去未結合的酶標二抗。
9. 加底物溶液：向各孔中加入底物溶液，輕輕混勻。
10. 顯色：將酶標板放入37℃溫箱中繼續溫育15分鐘。
11. 終止：向各孔中加入終止液，混勻。
12. 測量：在450nm波長下測量各孔的光密度值（OD值）。
兔碳酸酐酶III(CA3) ELISA 試劑盒 怎么用 96T/48T
操作注意事項1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用室溫平衡 20 分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正?，F象，水浴加熱使結晶溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 濃度為 0 的標準品可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋 5 倍，終結果乘以5才是樣本終濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用充分搖勻。
6. 若中英文說明書有誤，請以中文說明書為準。
7. 20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按 1：20 稀釋，即 1 份的 20×洗滌緩沖液加 19 份的蒸餾水。
8. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
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樣本處理
1.組織取出盡量進行心臟灌流2.組織表面不能有毛發等不相關組分
3.組織稱重(mg)后立即放入EP管中
4.向EP管中加入9倍量的PBS (μL)
5.用勻漿機進行組織勻漿
6.離心
7.小心吸取上清
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